shRNA转染后，什么时候做RT-PCR最好?

shRNA转染后，进行RT-PCR的最佳时间取决于多种因素，包括细胞类型、转染效率、shRNA的表达和目标基因的降解速度。一般来说，在转染后的24到72小时内进行RT-PCR是比较常见的时间点。具体来说：

1. 24小时后：在这个时间点，可以开始检测到shRNA的表达以及目标基因的初步下调情况。对于一些高效的shRNA，这个时间点可能已经有显著的基因沉默效果。
2. 48小时后：这是一个比较常见的时间点，此时大多数shRNA会有较高的表达水平，目标基因的降解也比较明显。对于大多数实验，48小时是一个不错的时间点进行RT-PCR检测。
3. 72小时后：对于一些目标基因降解较慢或者shRNA表达较慢的情况，72小时后进行RT-PCR检测可能会更合适。在这个时间点，基因沉默的效果通常更为显著。

为了确定最佳时间点，建议进行一个时间梯度实验，即在不同的时间点（如24小时、48小时、72小时等）取样并进行RT-PCR检测，比较目标基因的表达水平，从而选择最佳的检测时间点。