2024年 11 月 24日, 星期日
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体外培养细胞的一般性质(一)

细胞的存活及生长具有贴壁依赖性

绝大多数实体组织来源的细胞,在离开机体、于体外生存生长时,都具有贴壁依赖性,即以单层形式附着在培养瓶或培养皿表面的方式生长。如果无法贴壁(如接种细胞过多、总被摇动等),则细胞将会死亡。从组织中分离出来的细胞或
传代后的细胞,首先黏附于培养界面,在界面上铺展,然后才开始分裂、增殖。

细胞的黏附是通过特异的细胞表面受体与细胞外基质分子结合实现的。主要是整合素类,如纤黏蛋白(LN)、归巢素、层粘连蛋白(FN) 、胶原受体。在细胞铺展之前,细胞已分泌了细胞外基质蛋白和蛋白聚糖,井形成了基膜层。细胞外基质先黏着到培养瓶或培养皿的底面上,然后,细胞再通过特异的受体附着到基质上。因此,细胞曾经生长过的玻璃或塑料表面更适合细胞附着,用基质成分预处理培养器皿,如纤连蛋白、胶原或其衍生物(如明胶),有利于培养条件要求复杂的细胞附着和增殖。商品化供应的Matrigel 不但促进细胞贴壁,还有利于细胞表现其移动、分化等功能。

对纤维样细胞来说,它们在低密度时要进行迁移,所以,培养此类细胞主要是提供足够附着的底面;而对上皮细胞而言,细胞生存和生长的最佳条件是细胞间能正确接触, 因此,它们呈斑块状生长,培养时常需要一定的密度。

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