RNA 降解是非常严重的问题,在RNA提取过程中,为防止降解我们需要遵守以下4点基本规则:
基本规则
1. 把所有接触RNA 的塑料制品以及玻璃制品都高压灭菌。
2. 用于RNA 缓冲液的所有水都要经DEPC 处理。加DEPC 到终浓度0.1% ,再室温放放置过夜,或者灭菌15 min 。DEPC 不能用于Tris 缓冲液,因为DEPC 将会降解成乙醇和二氧化碳。
3. 避免碱性缓冲液,因为RNA 中的羟基对碱非常敏感。
4. 将RNA 缓冲液与其他缓冲液分开放置,避免用错或被RNases 污染。