请问蛋白半衰期30小时，siRNA转染后大约多久收样合适呢？

既然目标蛋白的半衰期是30小时，说明它在细胞中相对稳定，也就是说，蛋白不会很快降解。

在使用siRNA干扰该蛋白的表达时，有几个关键时间点需要考虑：

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一般siRNA作用流程：

1. 转染后6–12小时：siRNA开始被细胞利用，mRNA水平开始下降。

2. 24–48小时：mRNA水平通常显著降低（具体情况因靶基因和细胞类型而异）。

3. 48–72小时：蛋白水平逐步下降，尤其是对于半衰期较长的蛋白，需要更多时间来看到明显变化。

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针对你这个情况：蛋白半衰期为30小时

• 这意味着即使mRNA被抑制了，蛋白仍然要1–2天才会逐步降解。

• 所以，如果你要观察蛋白表达水平的下降（Western blot等），建议在转染后48小时到72小时收样比较合适。

  • 48小时：通常能看到一定蛋白下降；

  • 72小时：蛋白下降最明显，但也要注意siRNA的效应是否仍然持续。

• 如果你只看mRNA表达（qPCR），可以在24小时左右收样。

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总结建议：