大肠杆菌电转后，4度涂抹到培养基板子上会导致死亡吗？细菌电转后是不是比细胞还脆弱啊？

这个问题问得很实际，也很关键，特别是在做质粒转化实验的时候容易遇到。

回答一：大肠杆菌电转后，4℃下操作是否会导致死亡？

不会直接导致大面积死亡，但确实会影响转化效率。

电转后的大肠杆菌处于一种“受伤”的状态，细胞膜被电击短暂打破，虽然迅速恢复，但暂时很脆弱。

如果在电转后没有及时给予复苏（比如在SOC、LB等液体培养基中摇床复苏30–60分钟），就直接在低温（如4℃）下静置或操作，会：

细胞修复过程变慢；

质粒表达延迟或失败；

最终表现为转化效率显著下降。

所以电转后建议：

立即加入预热的SOC或LB复苏液；

37℃摇床复苏30–60分钟；

再均匀涂布到LB平板上，进行过夜培养。

回答二：电转后的细菌真的比哺乳动物细胞还脆弱吗？

某种程度上，是的，短时间内的脆弱程度可以相提并论。

哺乳动物细胞电转后会启动修复程序，但死亡率也很高；

大肠杆菌电转则是物理性破膜，它没有线粒体和复杂细胞器，但也很容易被不良条件（低温、干燥、高盐、强震动）杀死；

没有及时复苏或者电转条件设置不当（电压过高、缓冲液含盐过多）都可能直接导致细菌死亡或质粒不进入细胞。

小贴士

冰冷的平板不会直接杀死细菌，但转化效率会降低；

电转时的“脆弱”，不是因为细菌“孱弱”，而是因为它们在“修复电击的伤口”；

想要高转化率，复苏是必须步骤。