慢病毒滴度较低,通常需要较高的 MOI(如 20)才能有效感染,而正常病毒滴度较高,合适的 MOI 可能为 0.1。要将两者放在一起进行比较,可能需要考虑以下因素:
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实验目的:
- 如果关注的是相同数量的感染细胞,可以根据感染效率调整 MOI,以保证相似的感染率。
- 如果关注的是病毒自身的感染特性,可能需要分别选择最佳 MOI 进行单独实验,再综合分析。
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病毒载量标准化:
- 可以通过 qPCR 或 WB 检测病毒蛋白水平,确认不同 MOI 设定下的病毒表达是否具有可比性。
- 以某种方式归一化感染水平(如 GFP 计数、蛋白表达等)。
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细胞状态:
- 过高的 MOI 可能会影响细胞活性,导致额外变量,需要通过细胞活力实验(如 CCK-8、MTT)验证合适的 MOI。
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实验重复与统计学分析:
- 进行多个 MOI 梯度实验,选择合适的 MOI 组合,以确保比较结果的可信度。