使用带有GFP荧光标记的慢病毒感染细胞，想要检测GFP阳性率，通常用什么方法？

如果您使用的是带有GFP荧光标记的慢病毒感染细胞，想要检测GFP阳性率，通常情况下可以通过流式细胞仪来实现，步骤如下：

1. 收集细胞：首先收集感染后的细胞，并用适当的缓冲液进行重悬。
2. 去除死细胞：可以通过加PI（碘化丙啶）或7-AAD等染料来排除死细胞，这样有助于提高检测的准确性。
3. 流式检测：使用流式细胞仪时，选择FITC通道（通常是FL1通道），因为GFP的荧光发射峰大约在508 nm，正好匹配FITC的发射波长。流式细胞仪会根据GFP的荧光信号来判断哪些细胞是GFP阳性。
4. 分析数据：通过流式细胞仪软件（如FCS Express、FlowJo等）分析数据，计算GFP阳性细胞的比例。

注意事项：

• GFP荧光较弱时，确保流式细胞仪的设置（如激光强度、增益等）足够灵敏。
• 如果您的实验中使用了其他荧光标记，确保不同荧光通道没有干扰。
• 根据实验需要，您可能还要考虑其他因素，如细胞密度、细胞群体的散射特性（如FSC/SSC）等。

如果没有其他额外标记，以上方法足以准确测量GFP阳性细胞的比例。