细胞密度确实会影响转染效率和蛋白表达。如果细胞密度过高,可能会导致以下问题:
- 营养和废物积累:高密度会导致培养基中的营养迅速消耗,废物积累增加,这会影响细胞的健康状态,进而影响蛋白表达。
- 转染效率降低:高密度时,转染试剂和DNA更难均匀分布,影响转染效率。
- 蛋白表达影响:过度拥挤的细胞状态可能导致蛋白表达效率下降,甚至可能出现表达异常。
建议:
- 调整转染密度:可以考虑在细胞密度较低时(例如20-30%)就进行转染,确保转染时细胞有充足的空间和营养。
- 优化培养条件:如果必须等待到60小时,可以更换培养基,以减少废物积累并补充营养,但仍需小心控制密度。
- 缩短后续检测时间:在转染后尽量在48-72小时内进行检测,以获得最佳蛋白表达效果。