2024年 11 月 21日, 星期四
新闻

藻类细胞电转和动物细胞电转用的仪器有区别吗

是的,藻类细胞和动物细胞电转所用的仪器通常有一些区别。具体来说,电转仪器的选择和设置参数会因细胞类型的不同而有所不同,以下是一些主要的差异:

1. 电转仪器的类型

  • 藻类细胞通常会选择高压短时脉冲电转仪,因为藻类细胞多有细胞壁,且结构较坚硬,需要较高的电压来突破细胞壁,使 DNA 进入细胞。
  • 动物细胞(尤其是哺乳动物细胞)一般选择低压长时脉冲电转仪,因动物细胞无细胞壁,电转时需要较低电压以避免损伤细胞。

2. 电压范围

  • 藻类细胞通常需要较高的电压(通常在 1000-3000V 范围)来有效穿透细胞壁。某些特定藻类可能还需进行参数微调来找到最佳电压。
  • 动物细胞通常使用较低的电压(一般在 200-500V),以保护细胞膜和细胞内部结构。

3. 脉冲持续时间

  • 藻类细胞由于电压较高,脉冲时间一般设置非常短,通常在毫秒级。这样可以减少高压对细胞的破坏。
  • 动物细胞的脉冲时间相对较长,通常在几毫秒到几十毫秒之间,有时会使用多次脉冲,以确保 DNA 顺利进入细胞而不会过度损伤。

4. 缓冲液的组成

  • 藻类电转所用的缓冲液通常会加入一些稳定细胞的成分,如渗透保护剂(如甘油或蔗糖),以保护细胞在高电压下不被过度破坏。
  • 动物细胞电转缓冲液多为等渗或轻微高渗,成分相对简单,以减少对细胞的化学压力。

5. 设备配置

  • 藻类电转设备可能需要特殊的高压电源模块,或者一些设备允许更高的电压调节,以适应不同种类藻类的需要。
  • 动物细胞电转设备多设计为低压模式,有的设备还提供了特定波形或多脉冲模式,专门用于优化动物细胞电转效果。

6. 电极类型

  • 藻类电转常用间隙电极平板电极,间隙电极适合处理较硬的细胞壁,有时可以根据细胞大小调整间隙距离。
  • 动物细胞电转则通常使用圆柱形或平行板电极,这些电极更适合细胞悬液,且能均匀分布电场,适合动物细胞较柔软的细胞结构。

总结

总体来说,藻类细胞电转和动物细胞电转的主要区别在于电压、脉冲时间、电极类型缓冲液。藻类由于细胞壁的存在和细胞的特殊结构,需要更高的电压和更短的脉冲时间,且电转仪器的设置和参数往往需要经过更细致的优化。而动物细胞因为没有细胞壁,对电压和时间要求相对温和,因此常用的电转仪更适合低压和长时脉冲。

不同的电转仪器在设计和功能上会根据这些差异进行优化,因此在实验时,通常需要选择适合特定细胞类型的设备和设置。

Check Also

我自己订的shRNA的质粒,不管是瞬转还是稳转,转录水平敲下来了百分之90了,但是蛋白水平就是不变😰。48小时、96小时、120小时我都收过,都是这样。我该怎么办呢?

根据描述,您的shRNA已经成 …

发表回复

您的电子邮箱地址不会被公开。 必填项已用 * 标注