英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
原创文章，转载请注明出处。
生物硕士苦啊，2年多了。课题仍然停滞不前。
话说我是一枚研究大脑基因功能的小硕，具体研究的是大脑某神经相关基因的功能，这个基因的功能事关人的智力认知，研究好了，会造福人类，想想真是激动啊。
可想想我的研究，却一点也无法激动。实验卡住了，卡住了……，拯救愚蠢的人类不容易啊！我不想拯救了，我硕士快毕不了业了！
大脑真是个神奇的东西。研究基因的功能，一种常用的方法，就是基因敲除，名称拗口高深，其实就是把基因从出生就破坏了，基因的功能就没有了，其他器官尚可，胳膊腿出点问题么有关系，但大脑出问题，就要命了。所以，基因敲除研究大脑，很难，很难。
难就不做呗……，可是不行啊。
时间不够了，换课题也来不及了。
唉，正当我一筹莫展，给我女朋友倒苦水的时候，女朋友突然说了一句“我最近好像看到了一种基因敲除的新方法。”
“啥，啥方法？”我一听有新方法，赶紧追问。
“我也不是很清楚。好像是用转染试剂注射小鼠，达到基因敲除的效果”女朋友不太确定。
我一听，眉头皱了皱，嘴里仍旧答道：”好咧，我一会儿去查查。”说实话这个方法听起来太陌生了，不知道能不能行。不过，又转头一想，万一呢？万一就能用呢？毕竟，我现在也只有试试了。
在网上搜索动物体内转染试剂，只查到了一家公司。照着官网上的电话打过去问了问，公司技术人员表示我的实验可以用体内试剂做出来。而且只要3天就可以出结果，有这等好事？！
靠谱吗？
靠不靠谱，看文献，科研狗都知道。
第一篇是发表在《EXPERIMENTAL NEUROLOGY》期刊上的文章，研究的是circRNA对大脑神经的影响，用转染试剂结合circRNA注射小鼠脑室后，western-blot检测了蛋白表达水平的显著变化，然后通过各项其他实验，发现circRNA与CXCR2-mRNA之间的作用关系，进而发现其潜在的促炎作用在TBI后继发性损伤中发挥作用，这可能不利于TBI 后的神经功能恢复。
第二篇是发表在《Neuropharmacology》期刊上的文章，主要研究miR-23b对阿尔兹海默症的改善作用。作者用体内转染试剂结合miR-23b、miR-23bNC注射小鼠脑室得到基因敲除模型后，发现miR-23b通过靶向GnT-III 减轻引发阿尔兹海默症的Aβ和tau病理，miR-23b的过表达可以中断阿尔茨海默病的发病机制。
第三篇是发表在《Journal of Neuroinflammation》期刊上的文章， 作者主要是借助体内转染试剂，注射靶向CXCL13的shRNA到小鼠脑室，qPCR/western blot检测到CXCL13的mRNA和蛋白表达水平较对照组显著降低，后续研究发现CXCL13基因敲除部分逆转了手术对CXCR5和认知功能障碍的影响。
第四篇是发表在《Cell Death and Disease》期刊的文章，作者通过注射结合体内试剂的MiR-98 agomir到小鼠脑室， 荧光观察表达水平显著变化，结合后续实验揭示了EVs衍生的miR-98在缺血性卒中后的脑重塑过程中作为介导神经元和小胶质细胞通讯的细胞间信号。
第五篇是发表在《Cell Cycle》期刊的文章，作者通过给小鼠脑室注射靶向PTEN基因的si-PTEN达到基因敲除目的，qPCR和western blot实验都在si-PTEN组检测到PTEN基因mRNA和蛋白水平表达显著下调，作者借助这个模型揭示了PTEN的沉默激MEK1/ERK信号通路来抑制七氟醚诱导的海马细胞OS损伤和细胞凋亡。
哇，难道我绝处逢生了?
赶紧拿起电话，先订一只试试。
说不定我马上就可以得到实验结果，发一篇Nature子刊，光照课题组，走上人生巅峰。
然而，事情并不顺利……哎，且听我下回分解。