细胞的支原体检测——扫描电子显微镜法

（一）原理

利用电子显微镜的超级放大功能， 直接观察培养细胞中支原体污染情况。

（二）材料与设备

待检测细胞， 0.05％胰蛋白酶／0.02%EDTA 、2.5％的戊二酸、1％饿酸、0.1mol/L磷酸缓冲溶液（ pH7.4 ) ，扫描电镜及相关设备。

（ 三）操作步骤

1. 将待检测细胞传代至贴有盖玻片的培养皿中。
2. 37°C , CO₂ 培养箱中培养24h , 取出盖玻片。
3. 以PBS 洗涤3 次。
4 . 以2 .5％戊二醛/PBS 固定15min , PBS 洗涤。
5 ．以1％饿酸固定30min, PBS 洗涤。
6 . 乙酸异戊酯脱水。
7. CO₂ 冰点干燥。
8. 喷金。
9 . 扫描电镜观察，照相。

（四）结果分析