体外培养细胞的能量代谢
体外培养细胞的主要能量来自葡萄糖。大多数培养液含1 g/L (5.55mmol/L)葡萄糖, 近年来含4.5g/L 葡萄糖的高糖培养液(主要是DMEM 和RPMil640 ) 使用得越来越多。这使得细胞增殖更快。葡萄糖主要被细胞用作糖酵解的碳源,以乳酸为终产物。培养细胞中三狻酸循环(也称拧檬酸循环)仍然活跃,氨基酸作为碳源,特别是谷氨酰胺( Gin ) ,通过酶氧化成谷氨酸,通过转氨作用形成酮戊二酸进入三羧酸循环。因此,有些细胞对培养液中的谷氨酰胺很敏感。由于谷氨酰胺不稳定,在长时间保存的培养液中, Gin 通过脱氨作用会产生对细胞有毒的氨, 不利于细胞生长,所以常常需补加或现加现用。有公司生产的Glutamax 培养液中谷氨酰胺以二肽形式存在, 在培养液中较稳定,可常规加在大量配制的培养液中。生长缓慢的细胞还可通过补加丙酮酸钠,提供更多碳源,有助于细胞生长。