1.提前一天细胞铺板
提前一天种植细胞,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。
- 感染实验
⑴将EnvirusTM-LV用无血清稀释液稀释(用量参见下表),充分混匀,制成增强剂稀释液。
⑵将病毒浓缩液用无血清稀释液稀释(用量参见下表),充分混匀,制成病毒稀释液。
注:由于病毒浓度情况不同,具体病毒浓缩液用量酌情依据常规用量,建议进行和增强剂配合的梯度实验。
⑶将增强剂稀释液和病毒稀释液充分混合,4℃静置15分钟。
⑷上述混合液加入到含完全培养基的细胞上,37℃培养8小时后观察细胞状态,如没有明显变化,不要更换培养基,继续培养24小时后常规更换培养基。由于慢病毒感染较慢,一般在感染96小时后观察结果。