慢病毒感染贴壁细胞实验方法

1.提前一天细胞铺板

提前一天种植细胞，以感染时细胞融合度在50%左右为宜$\mathrm{悬}\mathrm{浮}\mathrm{细}\mathrm{胞}\mathrm{根}\mathrm{据}\mathrm{需}\mathrm{要}\mathrm{调}\mathrm{整}，\mathrm{不}\mathrm{要}\mathrm{采}\mathrm{用}\mathrm{过}\mathrm{高}\mathrm{的}\mathrm{细}\mathrm{胞}\mathrm{密}\mathrm{度}$。

2. 感染实验

⑴将Envirus^TM-LV用无血清稀释液稀释$\mathrm{用}\mathrm{量}\mathrm{参}\mathrm{见}\mathrm{下}\mathrm{表}$，充分混匀，制成增强剂稀释液。

⑵将病毒浓缩液用无血清稀释液稀释$\mathrm{用}\mathrm{量}\mathrm{参}\mathrm{见}\mathrm{下}\mathrm{表}$，充分混匀，制成病毒稀释液。

注：由于病毒浓度情况不同，具体病毒浓缩液用量酌情依据常规用量，建议进行和增强剂配合的梯度实验。

⑶将增强剂稀释液和病毒稀释液充分混合，4℃静置15分钟。

⑷上述混合液加入到含完全培养基的细胞上，37℃培养8小时后观察细胞状态，如没有明显变化，不要更换培养基，继续培养24小时后常规更换培养基。由于慢病毒感染较慢，一般在感染96小时后观察结果。