常见问题 | 解决对策 |
两块玻璃板之间灌胶,胶总是不平 |
玻璃没有洗干净,应该洗得很干净 |
过硫酸铵和TEMED加量相对较多 | |
加完试剂后应摇匀 | |
总是漏胶 | 避免玻璃边缘(与胶条接触处)破损 |
将两块玻璃板摆放对齐,底部处于同一平面 | |
膜上有明显气泡 | 操作时将气泡完全排除 |
靠膜一侧的滤纸应铺平 | |
特异性低 |
优化一抗 |
提高一抗和二抗的稀释度 | |
降低SDS-PAGE中蛋白的上样量 | |
背景高 |
优化封闭液 |
优化洗涤缓冲液,增加洗涤次数 | |
减少曝光时间 | |
信号低 |
优化一抗 |
浓缩样品 | |
选择更高灵敏度的发光液,如enlight等。 |