ECL发光液常见问题及解答2

4：Western Blot化学发光(ECL)时，胶片上条带很浓怎么办？

对ECL发光来说，可以减少发光时间和显影时间。对英格恩Enlight发光液来说，可以将压过的膜重新用TBST洗涤10min×3次后重新曝光操作。

5：Western blot化学发光(ECL)时，胶片上条带很弱怎么办？

对ECL发光来说，可适当延长曝光时间。如果还是不行，增加蛋白的上样量，增加抗体的用量，同时设立相应的对照，确认实验过程的有效性。

6：Western blot化学发光(ECL)时，出现非特异条带怎么办？

非特异条带以边界清晰的条带为标志，区别于边界不清晰的背景。首先，必须明确，如果曝光出现非特异条带，肯定是存在真实的蛋白条带，只是条带不是预期的。对明显的非特异条带，建议深入分析，而不是通过曝光时间等处理隐藏条带。蛋白的降解，上样量，抗体，目的蛋白的修饰等都有可能出现非特异条带。