移液枪对我们医药生物研究人员来说是最熟悉不过了。可是,你真正了解它吗?你的使用方式是正确的吗?相信不少人听到这个问题后,已经开始回想自己平时的操作,也有一部分人在认真考虑答案了吧。细节决定成败,今天在这里跟大家普及一下移液枪的使用规程,希望对大家以后的实验有帮助。
一、移液枪的使用规程
1. 移液枪的放置
移液枪要放在支架上
2. 样品准备
要求液体温度与吸头一致,偏大或偏小都会影响移取的液体体积
液体温度>吸头的 移取的液体体积会偏大
液体温度<吸头的 移取的液体体积会 偏小
3. 设定容量
1)移液器要在规定的容量内使用,切勿超量程使用,否则会卡住内部机械装置而损坏了移液器。
2)调整容量时,如果从大到小时,可以直接调到想要的容量;如果从小到大时,一定要调超三分之一圈,然后再调回来,这样做可以使弹簧完全放开,而且移液器总是在顺时针运转可以延长移液器的使用寿命。
4.安装枪头
将移液枪端垂直插入枪头,稍用力左右微微转动即可上紧。切勿在将枪头套上移液枪时,使劲地在枪头盒子上敲几下,这样会导致移液枪的内部配件(如弹簧)因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散,甚至会导致刻度调节旋钮卡住,严重的情况会将白套筒折断。
5.预洗
安装的新吸头或增大了容量值以后,应该把需要移取的液体吸取、排放两到三次,这样做是为了让吸头内壁形成一道同质液膜,确保移液工作的精度和准度,使整个移液过程具有极高的重现性。其次,机溶剂和高挥发液体,会在白套筒室内形成负压,从而产生漏液的情况,这时就需要我们预洗四到六次,让白套筒室内的气体达到饱和,负压就会自动消失。
6.吸液
1)按到第一档,将枪头垂直进入液面3-5毫米。
2)平缓松开控制按钮,否则液体进入吸头过速会导致液体倒吸人移液器内部,产生反冲和气泡,导致移液体积不准确。
3)停顿1~2秒钟后,经枪头移出液面,并确保枪头外无液体。
PS:观察是否有液滴缓慢 的流出。若有流出,说明有漏气现象。
原因:枪头未上紧;移液枪内部气密性不好。
7.排液
1)枪头以一定角度贴壁,
2)缓慢将控制按钮按到第一档,稍微停顿1s,
3)待剩余液体聚集后,将控制按钮按到第二档将剩余液体全部压出,
4)慢放控制按钮,
5)安去除装置弹射枪头。
二、移液枪的养护及注意事项
1.移液器使用完毕后,把移液器量程调至最大值,且将移液器垂直放置在移液器架上。
2. 当移液枪枪头里有液体时切勿将移液器水平或倒置放置,以防液体流入移液枪腐蚀移液枪。 应将移液器挂在移液器架上。
3.如液体不小心进入移液枪内应及时清除污染物。
4. 加液后若有液体滴出,说明移液枪漏气或者枪头没有插紧,建议把枪头插紧,若仍旧滴液,建议更换移液枪。
5.需要高温消毒的移液器应首先查阅所使用的移液器是否适合高温消毒后再行处理。
6.吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指,绝不允许突然松开,以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。
7.吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时,吸头内壁会残留一层“液膜”,第二次吸取时的体积会大于第一次的体积。
8.卸掉的吸头一定不能和新吸头混放,以免产生交叉污染。
9.选择合适量程范围的移液器,切勿用大量程的移液器移取小体积样品
三、移液枪的校正
1. 移液枪使用一段时间后检查是否需要校正,以确保量程的准确。一般3-6个月常规检查一次,在20-25度左右进行。具体操作如下:
1)移液枪吸蒸馏水3次后弃掉,再用移液枪吸取1000ul和100ul的3蒸水或者去离子水各10次,每次称重(在最准的天平上)后记录实际重量,10次取平均值记为m1。(吸取多少体积的选择依据是移液枪的最大量程以及最大量程的10%的体积(如200ul的枪就选择200ul和20ul两个体积)
2)查看温度计值,查找蒸馏水在此室温下的密度值(见中华人民共和国行业标准 JTJ054-94第55页),计算出1000ul和100ul蒸馏水的标准重量m2。
3)计算准确度A,公式=(m1-m2)/m2*100,如果在允许误差范围内,则不需校正,如果超出则选择校正。
量程范围 | 容量(ul) |
准确度(%) |
20-200ul | 200ul | ±0.6 |
20ul | ±3.0 | |
100-1000ul | 1000ul |
±0.5 |
100ul | ±1.5 | |
1-5ml | 50000 | ±0.5 |
10000 | ±1.5 |
2. 校正
方法:根据第一步的比较结果,如果实际重量大于标准重量(m1>m2),说明移液枪移取的液体体积大于实际体积,应减少移液枪容量,让实际重量向标准重量靠近,用工具逆时针调整螺母。反之则反。这样反复调整至标准重量为止。
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