2025年 4 月 8日, 星期二
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请问蛋白半衰期30小时,siRNA转染后大约多久收样合适呢?

既然目标蛋白的半衰期是30小时,说明它在细胞中相对稳定,也就是说,蛋白不会很快降解。 在使用siRNA干扰该蛋白的表达时,有几个关键时间点需要考虑: 一般siRNA作用流程: 转染后6–12小时:siRNA开始被细胞利用,mRNA水平开始下降。 24–48小时:mRNA水平通常显著降低(具体情况因靶基因和细胞类型而异)。 48–72小时:蛋白水平逐步下降,尤 …

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在慢病毒滴度测定的倍比稀释实验中,为什么计算滴度时好像没用上复孔?

通常,在计算滴度时,我们会选取某个稀释度的特定数据(如阳性细胞数),但这个数据往往是复孔的平均值,或者用于确认某个稀释度的数据是否可靠。因此,虽然计算公式中可能未直接体现复孔的作用,但复孔实际上已经在前期数据处理中起到了关键作用。 总结:复孔的作用是提高数据的稳定性和准确性,即使计算滴度时没有直接体现,实际上已经通过平均值计算、异常值排除等方式间接影响了最终 …

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慢病毒滴度测定的倍比稀释实验中,设置复孔的作用?

在慢病毒滴度测定的倍比稀释实验中,设置复孔主要有以下几个作用: 提高实验数据的可靠性由于生物实验存在一定的随机误差,复孔可以减少实验数据的偶然性,提高测量的准确性和重复性。 计算平均值,减少误差即使计算滴度时可能未直接用到每个复孔的数据,而是取某个稀释度下的阳性孔(如GFP阳性细胞数或抗生素筛选存活细胞数),但通常会计算复孔的平均值,以降低误差。 观察实验一 …

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在比较慢病毒和正常病毒(阳性对照)时,如何合理调整 MOI 值,使其具有可比性?

慢病毒滴度较低,通常需要较高的 MOI(如 20)才能有效感染,而正常病毒滴度较高,合适的 MOI 可能为 0.1。要将两者放在一起进行比较,可能需要考虑以下因素: 实验目的: 如果关注的是相同数量的感染细胞,可以根据感染效率调整 MOI,以保证相似的感染率。 如果关注的是病毒自身的感染特性,可能需要分别选择最佳 MOI 进行单独实验,再综合分析。 病毒载量 …

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